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本实验全面改进了用于蛋白质起始翻译阶段研究的传统介质梯度离心法。以3 2 P (TMV -RNA)为供试mRNA在麦胚离体翻译系统中形成核糖体 mRNA复合物 ,在 10 0 μL蔗糖垫上 (含蔗糖、Hepes、KAC、Mg(AC) 2 和肝素钠 ,pH7.5 ) ,1.5× 10 4r·min-1离心 15 0min即可分离该复合物与游离mRNA。测定沉淀物的cpm值可对其定性定量分析。该方法简便快速、准确安全、成本低 |
关键词: 离心-同位素示踪法 核糖体-mRNA复合物 蔗糖垫 离心—液闪计数分析法 |
DOI:10.11841/j.issn.1007-4333.2003.03.069 |
修订日期:2003-03-17 |
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 39970 5 0 1) |
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Analysis method of ribosome-mRNA complex |
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Abstract: |
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Key words: ribosome mRNA complex,sucrose cushions,centrifugation liquid scintillation counting method |